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你知道细胞培养瓶清洗分哪几个步骤吗
点击次数:6 发布时间:2019-09-24
   细胞培养瓶就是平时我们用来培养细胞的仪器。一种是玻璃制品,另外是塑料制品,而且它的底部也有不同的形状,常见的有正方形和长方形的,当然还有三角形也是比较常见的形状,大小各异,从容量来分可以分为5毫升至500毫升等多种可供选择。瓶子的表面还可以经过一定的改造和处理,因为有些细胞的培养需要的是贴壁的培养方式,所以,根据培养瓶壁的面积大小还可以进行一定的分类。
 
  细胞培养瓶是进行长时间细胞培养和细胞扩增的理想之选,能有效防护细胞免受污染。细胞培养瓶从防止污染的角度而研发,为细胞培养提供安全保护。透气性培养瓶盖具有创新性滤膜,防止细胞污染,确保良好的气体通透性。生产过程中对每个培养瓶进行100%压力测试,大程度上保证实验过程安全。独特的圆弧形瓶颈设计,大大提高了培养瓶的可操作范围,确保细胞接种、培养基更换等操作更加简便、安全和可靠地进行。
 
  一、浸泡:
 
  1、新的细胞培养瓶由于在生产过程中使玻璃表面呈碱性并带有铅、砷等对细胞有毒的物质,故要先将培养瓶于5%稀盐酸溶液中浸泡过夜。浸泡时,完全浸入,瓶内无气泡空隙残留。
 
  2、使用过后的培养瓶应立即于加有洗衣粉的自来水中浸泡,至少6h。浸泡时,完全浸入,瓶内无气泡空隙残留。
 
  二、刷洗:
 
  用软毛刷刷洗培养瓶,以去除瓶内外表面的杂质。需注意两点:一是防止损坏培养瓶内表面光洁度以影响细胞的生长,刷洗时不宜用力过猛;二是不能留有死角,要特别注意瓶角和细胞贴壁面的刷洗。刷洗后要将培养瓶冲洗干净,一般至少要冲20遍,直至瓶壁不挂水珠。放入烘箱内,烘干。
 
  三、泡酸:
 
  泡酸可完全清除培养瓶内残留的未刷洗掉的微量杂质。将培养瓶泡酸时,要戴3层手套,注意防止酸液溅起来,灼伤皮肤,应将瓶子轻轻浸入酸液。瓶内完全充满酸液,不留气泡空隙,一般需浸泡4~6h。(由于我们的酸液颜色不是红棕色,需浸泡过夜。)
 
  注意:瓶盖不能泡浓酸,应置于5%稀盐酸溶液中浸泡,完全没入酸液中。
 
  四、冲洗:
 
  用流水彻底冲洗培养瓶。首先用自来水将细胞培养瓶子灌满,再倒掉,重复20遍以上,直至不留任何残迹,瓶壁不挂水珠;然后用二蒸水洗2~3遍;后用三蒸水洗1遍。放入烘箱内,烘干。备用。
 
  五、灭菌:
 
  用前1~2天,取出瓶子,拧松盖子,用牛皮纸包住瓶口,系上绳子,贴上灭菌指示胶带,作好标记。或者拧松盖子,直接放入铺有锡箔纸的铝盒内,铝盒外包上报纸,系上绳子,贴上灭菌指示胶带,作好标记,121℃,30min灭菌。灭菌后,待温度降到60℃以下时,开盖取出,放入无菌烘箱内烘干。烘干后,拧紧瓶盖,取出。喷洒酒精后放入超净工作台或放入专门放置灭菌后物品的柜子里。