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透析袋夹的使用小技巧分享
点击次数:53 发布时间:2019-03-18
   透析袋夹只需要使用专用的半透膜即可完成。透析袋夹通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,透析袋内样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到透析袋外,直到透析袋内外两边的浓度达到平衡为止。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为"保留液",透析袋(膜)外的溶液称为"渗出液"或"透析液"。透析袋透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析袋夹透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。透析袋夹的处理:可先用50%乙醇煮沸1小时,再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶液洗涤,后用蒸馏水冲洗即可使用。实验证明,50%乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。(也可先在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟,用蒸馏水彻底清洗后,再放在1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。)使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水中,确保透析袋夹始终浸没在溶液内。若长时间不用,可加少量NaN2,以防长菌。从此时起取用透析袋必须戴手套。洗净凉干的透析袋弯折时易裂口,用时必须仔细检查,不漏时方可重复使用。
 
  透析袋夹使用方法:
 
  1.使用时,一端用橡皮筋或线绳扎紧,也可以使用特制的透析袋夹夹紧,由另一端灌满水,用手指稍加压,检查不漏,方可装入待透析液。
 
  2.通常要留1/3~1/2的空间,以防透析过程中,透析的小分子量较大时,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。
 
  3.为了加快透析速度,除多次更换透析液外,还可使用磁子搅拌。
 
  4.透析的容器要大一些,可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。小量体积溶液的透析,可在袋内放一截两头烧圆的玻璃棒或两端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液面以下。
 
  5.检查透析效果的方法是:用1%BaCl2检查(NH4)2SO4,用1%AgNO3检查NaCl、KCl等。
 
  保存条件:冷却或使用后,将洗干净的透析袋夹存放于4度,必须确保透析袋始终浸没在蒸馏水或溶液中。若长时间不用,可加少量NaN2,以防长菌。从此时起取用透析袋必须戴手套。