返回首页 在线订单 联系我们

服务热线:86-021-54175113

技术文章
当前位置:首页 > 技术文章 > 细胞刮刀的实验步骤你要了解吗
细胞刮刀的实验步骤你要了解吗
点击次数:62 发布时间:2019-03-07
   细胞刮刀表面是一个新型的细胞培养处理表面,增加了表面湿润的持久性和细胞吸附的稳定性超低吸附板的特征是共价结合的水凝胶层将细胞吸附、蛋白吸附和细胞的激活降到较低具有凝聚环的不可逆的盖减少污染,统一边角方便堆放带有字母单孔识别,平底经过细胞吸附化处理(标注产品除外)经过伽马射线灭菌,经过无热源认证。
 
  细胞刮刀的刀片是由高分子材料TPE制成,长柄是由高分子材料ABS制成,主要是适用于收获细胞,其优化设计,确保对细胞损伤,并尽可能接触细胞生长的所有器皿表面。用于人工收获细胞,优化设计确保对细胞较小的伤害并尽可能接触细胞生长的所有表面。细胞刮刀常用于从培养皿中收获细胞(尤其是干细胞)。
 
  细胞刮刀实验步骤:无菌条件下取新生小牛大脑皮层灰质部,4℃D-Hank′s液洗涤4次,至无血迹残留。剪成1mm3左右的组织碎块并置于玻璃匀浆器内,加入两倍体积的MEM培养基,匀浆上下20次?匀浆液先用100目(直径149μm)尼龙网布式漏斗抽滤,培养基洗涤4次,收集滤液。然后用200目(直径74μm)尼龙网布式漏斗抽滤,MEM培养基洗涤4次。细胞刮刀收集200目尼龙网上的组织(即牛脑微血管),将其置于离心管中,1500r/min离心洗涤10min。离心洗涤的脑微血管悬浮于的0.1%胶原酶中,旋涡振荡15sec以充分混匀,置于37℃恒温振荡水浴箱中振荡消化50min,取出后旋涡振荡15sec,1500r/min离心10min,弃上清,用20%BCS的培养基悬浮,接种于明胶铺被的培养瓶中(培养瓶中加入1%明胶-D-Hank′s液洗涤3ml,37℃孵箱中放置24h,用前倒掉明胶溶液即得明胶覆盖的培养瓶),置于细胞培养箱中,37℃、5%CO2、饱和湿度条件下培养。静置5~7天后,可见少量细胞生长,20%BCS的MEM培养液换液,以后每2~3天换液一次,至细胞长成致密单层后可传代培养。